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睿信生物-牛N-乙酰葡萄糖胺转移酶-I-GnTI-ELISA试剂盒
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公司介绍
生物药物分析方法开发
分析方法验证
高品质科研elisa试剂盒、化学发光试剂盒开发与定制
供科研使用,不得用于临床检验。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司,目前可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务,涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。依托湖北武汉、江苏南京、福建泉州三大研发及销售 ,布局全国市场。
我们致力于为高等院校、研究机构、诊断试剂厂家、生物制药公司、动物造模公司等科研单位,提供高质量检测试剂盒、方法学开发及实验外包服务,为客户的科学研究提供可靠的技术支持。公司干技术人员均有10年以上的从业经验,是值得您信赖的科研伙伴!
企业建立了完善的研发系统和生产设备,并与知名高校、研究机构、 企业等建立战略合作关系。公司自成立以来,就非常注重企业信息化的建设,我们采用了先进的内部供应链信息处理平台,保证客户的需求可以准确、高效处理。
为每一位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。
样本处理:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射,不能使用过期产品。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
牛N-乙酰葡萄糖胺转移酶-I GnTI ELISA试剂盒
摘 要: 目的:观察不同类型乙型病毒性肝炎患者中炎性因子的表达及组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)的表达,探讨其在不同程度肝损伤患者中发生的意义。方法:收集临床乙型病毒性肝炎重型、重度、轻度患者及健康人外周血标本,分离血清及单个核细胞(PBMC),用ELISA方法检测各组血清中IL-4、TNF-α、IFN-γ的表达及PBMC中HDAC1的表达,用RT-PCR方法检测PBMC中HDAC1 mRNA的表达。结果:IL-4、TNF-α、IFN-γ与HDAC1蛋白表达水平的相关性较高,重型组与重度组之间以及轻度组与正常人组之间的炎性因子表达及HDAC1表达差异无显著性意义(P〉0.05),与轻度组和正常人组相比,重型组和重度组的IL-4、TNF-α、IFN-γ及HDAC1的蛋白表达以及HDAC1 mRNA的表达均升高。结论:IL-4、TNF-α、IFN-γ等相关炎症因子与乙型病毒性肝炎的病情程度密切相关,HDAC1在炎症因子的表达过程中可能发挥重要作用。
牛N-乙酰葡萄糖胺转移酶-I GnTI ELISA试剂盒
目的研究钙蛋白酶抑制剂 ALLN对缺血-再灌注(I-R)大鼠心肌肌浆网钙泵(SERCA)功能的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为正常灌注组(对照组)、I-R组、ALLN+I-R组和二甲亚砜+I-R组(DMSO+I-R组),分别检测再灌注15min 时冠状动脉流出量(CF)和冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;荧光分光光度计测定荧光强度来反映钙蛋白酶活性;分别采用改良p-NPP法和 Millipore过滤技术测定SERCA的活性和ATP依赖的SERCA45Ca2+摄取率,免疫印迹法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与 I-R组相比,ALLN+I-R组CF、SERCA蛋白表达水平、SERCA的活性和45Ca2+摄取率显著增高(P0.01),而LDH漏出量和钙蛋白 酶活性显著降低(P0.01)。结论 ALLN对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,与其抑制钙蛋白酶活性,一定程度减轻I-R损伤对SERCA功能及蛋白表达水平的影响有关。
牛N-乙酰葡萄糖胺转移酶-I GnTI ELISA试剂盒
目的:热休克蛋白90α(HSP 90α)是细胞受应激原刺激后诱导产生的一种应激蛋白,在肿瘤组织中HSP90α表达量达正常组织表达水平的2-10倍。其在血液中的含量与肿瘤恶性程度呈正相关。HSP90α作为一种全新肿瘤标志物,用于肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、结直肠癌等多个肿瘤的临床检测。患者血浆中HSP90α含量水平对应患者病情变化,可实时、较准确地反映治疗效果,在临床上可为医生提供诊断、治疗、预后的客观依据。本实验针对此蛋白进行系统研究,建立人血清中热休克蛋白90α(HSP90α)的荧光免疫层析定量检测方法。方法:1、采用人HSP90α融合蛋白,进行抗原纯度、浓度和生物活性的鉴定,免疫小鼠、利用间接酶联免疫吸附法(ELISA)效价鉴定、细胞融合、单克隆抗体制备、单抗纯度和亚型鉴定、蛋白纯化等实验操作步骤制备纯度较高的HSP90α单克隆抗体和多克隆抗体。2、研制用于定量检测的荧光免疫层析检测试纸条,通过采用荧光免疫层析技术,对荧光微球制备工艺进行优化,并对最佳反应时间、线性范围、精密性、回收率、临床检测等性能评价方面进行系统研究。初步建立了热休克蛋白90α荧光免疫层析检测方法。结果:1、共筛选出16株单克隆细胞株,经过亚型筛选以后共选出8株阳性细胞株,编号分别为3B2、4E3、4F4、5E2、7D1、7E4、8F2、8G4。2、经过8株单抗和多抗配对,挑选出8F2和多抗成为最优的一对配对抗体。确定了各反应条件,最佳反应时间为5min。线性范围0.39ng/m L-100ng/m L;灵敏度为0.0578ng/ml;精密性质控品高值(30ng/m L)CV=7.46%;低值(10ng/m L)CV=8.39%,高、中、低值血清的回收率分别为100.56%、99.76%、94.1%;与国外HSP90αELISA检测试剂盒平行检测40份临床患者血清,结果显示两者相关系数为0.9685。结论:1、通过单克隆抗体制备的实验过程,成功筛选出8株阳性细胞株,并挑选出一对配对抗体用于后续实验的研究。2、超声波技术在荧光微球活化过程中可降低聚集现象。3、初步建立的方法具有良好的精密性和线性,临床符合率能满足临床检测技术要求,有望完善后报批用于临床。